FastGene Scriptase III

Details

Meisterhafte Reverse Transkriptase

• Scriptase III ist eine verbesserte Variante der reversen Transkriptase des Murinen Leukämievirus (MuLV).
• Aufgrund spezifischer Mutationen in der RNase H-Domäne der reversen Transkriptase kann cDNA selbst aus sehr geringen Mengen an RNA synthetisiert werden.
• Scriptase III weist zusätzliche Mutationen auf, die sie noch robuster und thermostabiler machen. Sie kann daher mit maximaler Aktivität bis zu einer Temperatur von 55 °C arbeiten. Bei diesen erhöhten Temperaturen können sich hochstrukturierte RNAs leicht entfalten, sodass sie als Matrizen für die reverse Transkription dienen können. Sie ist die beste Wahl für komplexe Aufgaben wie Real-Time PCR und NGS.

Verbessertes technisches Enzym – für stark strukturierte RNA entwickelt

• FastGene^® Scriptase III ist eine verbesserte Version der M-MLV Reverse Transkriptase, die eine hohe thermische Stabilität (~55 °C) und eine geringe RNase H-Aktivität aufweist.
• Dieses Enzym ist in der Lage, bei 42 °C bis 55 °C mit hoher Spezifität und Ausbeute den ersten cDNA-Strang zu synthetisieren. Bei solch hohen Temperaturen können stark strukturierte RNAs leicht entfaltet werden, um als Matrizen für die reverse Transkription zu dienen.
• SuperiorScript III kann lange cDNAs (bis zu ~12 kb) synthetisieren.

Applikationen

• Quantifizierung der Genexpression
• Echtzeit-PCR
• Sequenzierung der nächsten Generation
• Aufbau von cDNA-Bibliotheken
• Schwierige Vorlagen mit sekundären RNA-Strukturen
• Sehr geringe RNA-Konzentrationen

Qualitätskontrolle

• Reinheit: >99 % auf SDS-PAGE
• Endonuklease- und Exonuklease-frei
• RNase-frei
• Inhibitor-frei
• Zufriedenstellende Ausbeute und Länge des cDNA-Produkts

Komponenten

FastGene^® Scriptase III wird mit zusätzlichen Komponenten geliefert, die für die Reverse Transkription benötigt werden.

Es beinhaltet 5 Fläschchen:

1. FastGene^® Scriptase III Restriktionsenzym
2. 5x First-Strand-Puffer (250 mM Tris-HCl (pH 8,3), 375 mM KCl, 15 mM MgCl₂)
3. 0,1 M DTT
4. dNTP-Mix (je 10 mM)
5. Steriles Wasser (RNase-frei)

Für dieses Produkt müssen Primer (oligo dT, random hexamer) separat erworben werden.

FastGene^® Scriptase III ist auch als cDNA-Synthesekit (LS66) oder cDNA 5x ReadyMix (LS67) erhältlich, siehe Bestellinformationen.

Steigern Sie Ihre cDNA-Synthese mit thermostabiler Präzision

Scriptase III setzt mit seiner verbesserten Thermostabilität einen neuen Standard für die Reverse Transkription und ermöglicht eine effiziente Aktivität bei Temperaturen bis zu ~55 °C. Diese erhöhte Temperatur hilft bei der Entfaltung von RNA-Sekundärstrukturen, was eine bessere Zugänglichkeit gewährleistet und die Empfindlichkeit von Reversen Transkriptionsreaktionen erhöht. Das Ergebnis ist eine höhere Ausbeute an hochwertiger cDNA in voller Länge.

Abbildung 1: Leistung der Scriptase III bei verschiedenen Temperaturen. Die Thermostabilität der Scriptase III gewährleistet eine zuverlässige Aktivität bis zu ~55 °C.

Steigerung der Produktivität durch höhere cDNA-Ausbeuten

Steigern Sie die Produktivität mit Scriptase III. Die Echtzeit-PCR-Analyse zeigt deutlich niedrigere Cq-Werte, was auf die Effizienz bei der Generierung von reichlich und qualitativ hochwertiger cDNA selbst bei minimalem RNA-Input hinweist.

Abbildung 2: Scriptase III zeigt im Vergleich zu konkurrierenden Enzymen eine hervorragende Produktivität und cDNA-Ausbeute für verschiedene RNA-Targets.

Unglaubliche Sensitivität

Mit der Scriptase III erhalten Sie eine präzise cDNA-Synthese selbst aus minimalen RNA-Proben. Dieses hochentwickelte Enzym für die Reverse Transkription gewährleistet eine zuverlässige Detektion von bis zu 0,1 ng Gesamt-RNA, wie anhand von HeLa-RNA-Extrakten gezeigt wurde. Die Ergebnisse der Real-Time PCR zeigen eine konsistente GAPDH-Amplifikation über RNA-Konzentrationen von 100 ng bis 0,1 ng, was die unübertroffene Sensitivität und Effizienz von Scriptase III belegt. Scriptase III eignet sich hervorragend für Anwendungen mit geringem Input und liefert konsistente, hochwertige cDNA, die auch den anspruchsvollsten Forschungsanforderungen gerecht wird.

Abbildung 3: Sensitivität von Scriptase III: Scriptase III gewährleistet den zuverlässigen Nachweis von bis zu 0,1 ng Gesamt-RNA-Extrakten.

Superschnelle cDNA-Synthese

Wenn Zeit eine entscheidende Rolle spielt, ist Scriptase III die richtige Lösung. Die Reaktionszeit kann bei Bedarf auf 30 Minuten verkürzt werden, ohne dass die cDNA-Ausbeute oder die Performance beeinträchtigt wird. Diese Flexibilität macht das Enzym zur idealen Wahl, um auch bei einem engen Zeitplan qualitativ hochwertige Ergebnisse zu erzielen.

Abbildung 4: Die schnelle Reaktionszeit von Scriptase III ermöglicht eine Verkürzung der Inkubationszeit auf bis zu 30 Minuten.

Bestellinformationen

Die FastGene^® Scriptase III ist als Enzym (LS55), als cDNA-Synthesekit (LS66) oder als gebrauchsfertige 5-fach-Mischung (LS67) erhältlich.

Skriptase-Vergleich

• Mit verbesserter Stabilität ist die Scriptase III bis zu ~55 °C stabil und kann lange cDNA-Fragmente mit einer Länge von bis zu 12 kB erzeugen.
• Es zeigt eine hervorragende Produktivität und mit hohen Ausbeuten und hohen cDNA-Konzentrationen.
• Die hohe Sensitivität des Enzyms ermöglicht die Synthese von cDNA aus kleinsten Mengen an Template-DNA.

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