Details
ReadyMix
Die FastGene® Scriptase II ist eine optimierte reverse Transkriptase mit einer reduzierten RNase H-Aktivität. Der 5x ReadyMix enthält alle notwendigen Komponenten zur Durchführung einer reversen Transkription in nur einem Reaktionsgefäß.
Optimiertes Enzym
Die modifizierte reverse Transkriptase ermöglicht die cDNA Synthese auch bei einer sehr geringen RNA Konzentration. Mutationen wurden in die RNase H Domäne der MuLV reversen Transkriptase eingebaut. Die RNA wird während der Erststrang-cDNA-Synthese nicht degradiert, so dass eine höhere Ausbeute an cDNA in der vollen Länge gewonnen wird. Zusätzlich führt die höhere thermische Stabilität der FastGene® Scriptase II zu einer gesteigerten Robustheit des Enzyms. Die FastGene® Scriptase II ist mit ihrer RNase H Domänmutation und ihrer höheren thermalen Stabilität die optimale Wahl für komplexe Anwendungsgebiete, wie RT-qPCR and NGS.
Niedrigere RNase H Aktivität für längere cDNA
Die FastGene® Scriptase II hat eine modifizierte RNase H Domäne. Aufgrund dieser wird die RNA nicht degradiert und dient als Templat für längere cDNAs – mit dem Ergebnis von Fragmentgrößen bis zu 12 kBp.
Optimierte Enzyme für die qPCR
Die FastGene® Scriptase II liefert ausgezeichnete cDNA Template für Nachfolgeapplikationen, wie z.B. qPCR und NGS. Die in voller Länge vorhandene, resultierende cDNA spiegelt ein kompletes Bild des zugrundeliegenden Gens wieder und ist in der Lage Modifikationen, wie z.B. Splicing Varianten, zu zeigen.
Beste Leistung − Produktvergleich
Ein aktueller Trend bei der Entwicklung von RT-Enzymen besteht darin, bei der Durchführung einer reversen Transkription sehr hohen Temperaturen standzuhalten (50+ °C). Unsere FastGene® Scriptase II zeigt jedoch schon bei 42 °C eine viel höhere Leistung. Bei dieser niedrigen Temperatur kann die FastGene® Scriptase II sogar Hochtemperatur-Enzyme übertreffen. 
Abbildung: Vergleich der Leistung von FastGene® Scriptase II (cyan) und einer hitzestabilen reversen Transkriptase von Mitbewerber A (orange). FastGene® Scriptase II ReadyMix und die Reverse Transkriptase von Mitbewerber A wurden gemäß den TDS-Empfehlungen für 5 bis 50 Minuten bei 42 °C oder 55 °C inkubiert. FastGene® Scriptase II ReadyMix übertrifft das Hochtemperatur-Enzym bei jedem Gen und zu jedem Zeitpunkt.
Tsintari Vasileia, Universitätsklinikum Tübingen, Labor für Experimentelle Hämatologie und Onkologie –
Wir haben das Produkt ausprobiert und wir waren mehr als zufrieden damit! Wir haben verschiedene qPCRs durchgeführt mit zwei unterschiedlichen Kontrollen (GAPDH und Tubulin-b), sowohl für Zellinien, als auch für Patienten Proben (Biobank tiefgefrorenen Biopsiegewebe), und die Ergebnisse, waren ganz gut! Die Kontrollwerte sind stabil geblieben im Vergleich zu unserem alten cDNA Protokoll und sogar mit weniger RNA als früher. Anwendung und Protokoll fanden wir ebenso super easy!
Translation by Nippon Genetics:
We use the Sciptase II Ready Mix and we were more than happy with it! We performed different qPCRs with two different controls (GAPDH and tubulin-b), for both cell lines and patient samples (Biobank frozen biopsy tissue). The results were quite good! The control values were stable compared to our old cDNA protocol, even with less RNA than before. The application and the protocol were very easy!
Verifizierter Benutzer