Details
Die FastGene® T4-DNA-Ligase katalysiert die Bildung einer kovalenten Bindung zwischen dem 5′-Phosphat und 3′-OH von zwei DNA-Enden. Dadurch können mit Restriktionsenzyme geschnittene DNA-Fragmente („Sticky ends“ oder “Blunt ends“) legiert werden. Die T4-DNA-Ligase kann auch RNA mit DNA oder RNA in einer Doppelhelix mit geringer Effizienz ligieren. Die Ligase wird in E.coli exprimiert und bis zur Homogenität gereinigt. Durch die hohe Reinheit ist die Ligase frei von Endonuklease, Exonuklease und Phosphatase.
Eigenschaften
- Molekulargewicht: 55 kDa
- Reaktionstemperatur: Raumtemperatur
- Hitzeinaktivierung: 65°C für 10 Minuten
Anwendungen
- Legierung von geschnittenen DNA-Fragmenten in ein Plasmid
- Addition von Linker- oder Adapter-DNA an kohäsive oder stumpfendige DNA
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