Détails
Puissante transcriptase inverse
- La Scriptase III FastGene® est un variant amélioré de la tanscriptase inverse Murine Leukemia Virus (MuLV).
- Grâce à des mutations spécifiques dans le domaine de la RNase H de la transcriptase inverse, l’ADNc peut être synthétisé même à partir de très petites quantités d’ARN.
- La Scriptase III possède des mutations supplémentaires qui la rendent encore plus robuste et thermostable. Elle peut donc fonctionner avec une activité maximale jusqu’à une température de 55 °C. À ces températures élevées, les ARN hautement structurés peuvent facilement être dépliés, ce qui leur permet de servir de template pour la transcription inverse. C’est le meilleur choix pour les tâches complexes, telles que la PCR en temps réel et le NGS.
Enzyme améliorée – Conçue pour les ARN très structurés
- La Scriptase III FastGene® est une version améliorée de la transcriptase inverse M-MLV, qui présente une grande stabilité thermique (~55 °C) et une faible activité RNase H.
- Cette enzyme est capable de synthétiser le premier brin d’ADNc à 42 ℃ – ~55 ℃ avec une spécificité et un rendement élevés. À ces températures élevées, les ARN très structurés peuvent être facilement dépliés pour servir de template à la transcription inverse.
- SuperiorScript III peut synthétiser de longs ADNc (jusqu’à ~12 kb).
Utilisations
- Quantification de l’expression de gènes
- PCR en temps réel
- NGS
- Construction de librairie d’ADNc
- Templates compliqués avec des structures secondaires d’ARN
- Concentration d’ARN très faible
Contrôle qualité
- Pureté : >99% sur SDS-PAGE
- Sans endonucléase et exonucléase
- Sans RNase
- Sans inhibitor
- Rendement et longueur satisfaisants des ADNc
Composants
Scriptase III FastGene® est livré avec des composants supplémentaires nécessaires à la transcription inverse.
Cela comprend 5 tubes, incluant :
- Enzyme de Restriction Scriptase III FastGene®
- Tampon “First-Strand” 5X (250 mM Tris-HCl (pH 8.3), 375 mM KCl, 15mM MgCl2)
- 0,1 M DTT
- Mix de dNTP (10 mM each))
- Eau stérile (sans RNase)
Ce produit nécessite l’achat de primers (oligo dT, hexamères aléatoires) séparément.
La Scriptase III FastGene® est aussi disponible avec un Kit de synthèse d’ADNc (LS66) ou avec un Mix prêt à l’emploi d’ADNc 5x (LS67), voir les informations de commande.
Améliorez votre synthèse d’ADNc grâce à la précision thermostable
La Scriptase III établit un nouveau standard pour la transcription inverse grâce à sa thermostabilité améliorée, lui permettant un fonctionnement efficace à des températures allant jusqu’à ~55 °C. Cette température élevée permet de dénaturer les structures secondaires d’ARN, ce qui améliore l’accessibilité et la sensibilité des réactions de transcription inverse.
Le résultat ? Des rendements plus élevés d’ADNc entiers et de haute qualité.
Figure 1 : Performance de la Scriptase III à différentes températures. La thermostabilité de la Scriptase III assure un fonctionnement fiable jusqu’à ~55 °C.
Augmenter la productivité grâce à des rendements supérieurs en ADNc
Augmentez votre productivité avec la Scriptase III. Les analyses PCR en temps réel révèlent des valeurs Cq significativement plus basses, ce qui indique son efficacité à générer un ADNc abondant et de haute qualité, même à partir d’une quantité minimale d’ARN de départ.
Figure 2 : Productivité de la Scriptase III. La Scriptase III montre une excellente productivité et rendement d’ADNc pour différentes cibles ARN, comparé à une enzyme compétitrice.
Sensibilité incroyable
La Scriptase III permet d’obtenir une synthèse précise d’ADNc, même à partir d’échantillons ARN minimes. Cette enzyme de transcription inverse de pointe assure une détection fiable jusqu’à 0,1 ng d’ARN total, comme montré avec des extraits d’ARN de cellules HeLa. Les résultats de PCR en temps réel montrent une amplification constante de la GAPDH pour des concentrations d’ARN allant de 100 ng à 0,1 ng, ce qui démontre la sensibilité et l’efficacité inégalées de la Scriptase III.
Parfait pour les applications à faible débit, la Scriptase III fournit un ADNc stable et de haute qualité pour répondre à vos besoins de recherche les plus exigeants.
Figure 3 : Sensitivity de la Scriptase III. La Scriptase III garantit une détection fiable jusqu’à 0,1 ng d’extraits d’ARN total.
Synthèse d’ADNc à grande vitesse
Lorsque le temps est précieux, la Scriptase III relève le défi. Son temps de réaction peut être réduit à 30 minutes si nécessaire, sans sacrifier le rendement ou la performance de l’ADNc. Cette flexibilité en fait un excellent choix pour obtenir des résultats de haute qualité, même dans des délais serrés.
Figure 4 : Temps de réaction de la Scriptase III. Le temps de réaction rapide de la Scriptase III permet de réduire le temps d’incubation à 30 minutes.
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