Détails
Ready Mix
Le ReadyMix Scriptase II 5X FastGene® est une enzyme génétiquement modifiée avec une activité RNase H réduite. Elle est envoyée prête à l’emploi avec tous les ingrédients nécessaires pour effectuer une transcription inverse.
Enzymes d’ingénierie
Les transcriptases inverses génétiquement modifiées permettent la synthèse d’ADNc à partir de très faibles quantités d’ARN. Des mutations sont insérées dans le domaine RNase H de la transcriptase inverse MuLV. Par conséquent, en ne dégradant pas l’ARN pendant la synthèse du premier brin, un rendement plus élevé en ADNc entier est obtenu. De plus, une stabilité thermique plus élevée augmente la robustesse de l’enzyme.
La Scriptase II FastGene® est exactement l’une de ces enzymes d’ingénierie. Avec sa mutation dans le domaine RNase H et sa stabilité thermique supérieure, elle constitue le choix optimal pour des utilisations plus complexes, telles que des RT-qPCR et du NGS.
Activité RNase H plus faible pour des ADNc plus longs
La Scriptase II FastGene® a un domaine RNase H modifié. L’ARN n’est donc pas dégradé et sert de matrice pour des ADNc plus longs, ce qui permet d’obtenir une taille de fragments pouvant atteindre 12 kpb.
Enzymes d’ingénierie – optimisées pour la qPCR
La Scriptase II FastGene® fournit des matrices ADNc de qualité supérieure pour ses utilisations en aval, par exemple pour de la qPCR et du NGS. L’ADNc entier obtenu donne une image complète du gène et permet de mettre en évidence des modifications, comme des variants d’épissage.
Meilleures performances – Comparaison des produits
Une tendance actuelle dans l’ingénierie des enzymes RT consiste à résister à des températures très élevées lors de la transcription inverse (50+ °C). Cependant, notre Scriptase II FastGene® affiche des performances bien supérieures même à 42 °C. À cette basse température, la Scriptase II FastGene® peut surpasser même les enzymes à haute température.
Consultez les données de comparaison avec le concurrent A, qui ont été réalisées à 55 °C :
Figure : Comparaison de la performance de la Scriptase II FastGene® (cyan) et d’une transcriptase inverse thermostable du concurrent A (orange). Le ReadyMix Scriptase II FastGene® et la transcriptase inverse du concurrent A ont été incubés pendant 5 à 50 minutes à 42 °C ou 55 °C, conformément aux recommandations de la TDS. Le ReadyMix Scriptase II FastGene® surpasse l’enzyme à haute température pour chaque gène et et à chaque relevé de temps.
Tsintari Vasileia, Universitätsklinikum Tübingen, Labor für Experimentelle Hämatologie und Onkologie –
Wir haben das Produkt ausprobiert und wir waren mehr als zufrieden damit! Wir haben verschiedene qPCRs durchgeführt mit zwei unterschiedlichen Kontrollen (GAPDH und Tubulin-b), sowohl für Zellinien, als auch für Patienten Proben (Biobank tiefgefrorenen Biopsiegewebe), und die Ergebnisse, waren ganz gut! Die Kontrollwerte sind stabil geblieben im Vergleich zu unserem alten cDNA Protokoll und sogar mit weniger RNA als früher. Anwendung und Protokoll fanden wir ebenso super easy!
Translation by Nippon Genetics:
We use the Sciptase II Ready Mix and we were more than happy with it! We performed different qPCRs with two different controls (GAPDH and tubulin-b), for both cell lines and patient samples (Biobank frozen biopsy tissue). The results were quite good! The control values were stable compared to our old cDNA protocol, even with less RNA than before. The application and the protocol were very easy!
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