Scriptase Basic FastGene

Transcriptase inverse

Scriptase Basic FastGene®

  • 20 000 Unités à 200 U/µL (pour 100 réactions)
  • Inclus le tampon (Tampon Scriptase Basic 10x FastGene®), le mélange de dNTPs (2 mM chacun) et l’eau stérile (sans RNase)
  • Sans endo- et exonucléase, sans RNase, sans inhibiteur
  • Transcriptase inverse pour la quantification de l’expression des gènes
  • Pour des hautes concentrations d’ADN
Prix sur demande


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Numéro de catalogue LS52

Détails

Optimisée pour de meilleures performances

Scriptase Basic FastGene® est une version améliorée de la transcriptase inverse du Virus de la Leucémie Murine (MuLV). Comme la version wild-type de la transcriptase inverse MuLV, elle a la capacité de synthétiser un brin d’ADNc, et présente une activité RNase H et une processivité réduites. Néanmoins, la robustesse de l’enzyme a été fortement augmentée. C’est l’enzyme idéale pour les grandes quantités d’ARN ou pour des matrices non complexes.

Utilisations
  • Quantification de l’expression de gènes
  • RT-PCR en point final
  • Hautes concentrations d’ARN
Pas d’inhibition – Même à forte concentration

La formulation spéciale du tampon permet une concentration élevée d’ARN. D’autres transcriptases inverses ne sont pas capables d’utiliser de telles quantités.

Conçu pour des RT-PCR en point final

Scriptase Basic FastGene® a été conçu pour de grandes quantités d’ARN, généralement utilisées dans les RT-PCR en point final. Néanmoins, elle peut également être utilisée avec des concentrations d’ARN plus faibles.

Enzyme seule ou Kit de synthèse d’ADNc

Scriptase Basic FastGene® est disponible en tant qu’enzyme seule (Scriptase Basic FastGene®, LS52), contenant l’enzyme, le tampon et les dNTPs, mais également en tant que Kit de synthèse d’ADNc qui contient les composants de l’enzyme seule, des Oligo dTs, des hexamères aléatoires et un inhibiteur de RNase (LS62).

Nous avons choisi un Kit de 100 réactions, pour que vous ayez suffisamment de solution pour une plaque 96 puits.

Comparaison de Scriptase Basic FastGene® et d’une MuLV conventionnelle

(A) Concurrent N                                       (B) Scriptase Basic FastGene®

ARN (ng)   2      1     0,5     0,1    0,01                        2       1      0,5     0,1    0,01

Fig. 1 : Meilleure sensibilité de Scriptase Basic FastGene®.
Comparée à une MuLV WT (A), la Scriptase Basic FastGene® (B) est une transcriptase inverse MuLV optimisée, avec une sensibilité plus élevée et capable de produire une matrice à partir de concentrations ARN aussi basses que 0,1 ng.

Documents

LS-52-Scriptase Basic Enzyme Manual

FAQ

J’utilise votre Scriptase Basic (LS52) et je voulais savoir si je pouvais utiliser cette enzyme en combinaison avec un Kit pour enlever l’ADN contenant un tampon DNase Stop avec 20 mM EGTA ?

Toutes les enzymes’ADN/ARN ont besoin d’ions métalliques tels que Mg2+, Ca2+, Mn2+, etc. La DNase I requiert également du Mg2+ ou du Ca2+. Le tampon DNase I Stop doit contenir 20 mM d’EGTA ou d’EDTA (en tant qu’agent de chélation des métaux) pour piéger les ions métalliques. Pour la plupart des enzymes, les concentrations optimales sont d’environ 1 à 10 mM. Donc, 20 mM d’EGTA suffisent pour arrêter les deux réactions : traitement à la DNase et RT.

Pour que la Scriptase Basic (LS52) continue de fonctionner, la concentration en Mg2+ doit être augmentée pour qu’elle atteigne à nouveau la concentration optimale de fonctionnement de l’enzyme. Mais dans ce cas, la DNase I refonctionnera aussi et dégradera l’ADN/ADNc.

C’est un problème courant avec toutes les transcriptases inverses.

Quelle est la plage de température optimale pour Scriptase Basic et Scriptase II ?

La plage de température optimale pour les Scriptases est de 42 °C à 50 ° C. Une température supérieure à 50 °C n’est pas recommandée.

Les Scriptase Basic et Scriptase II peuvent-elles être utilisées pour du NGS ?

Comme les Scriptase Basic et Scriptase II sont uniquement conçues pour de l’ADNsb, elles ne sont pas utilisables pour faire du NGS.

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